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單細胞分選及基因組研究、外泌體或細胞外微囊泡成為熱點議題

點擊次數:1956 更新時間:2017-07-13

一年一度的CYTO大會作為流式細胞學領域zui高水平的學術盛會,今年于6月10日-14日在美國波士頓市的海因斯會展中心隆重舉行。CYTO2017是由流式細胞學會 (ISAC) 舉辦的第32屆流式細胞學促進會,旨在通過各領域從事細胞學研究的工作者的經驗交流,促進細胞學研究的共同發展。CYTO不僅有世界各地的專家學者與參會者分享流式細胞學的應用進展,而且各大流式技術服務供應商也會紛紛展示的流式相關產品。
 


 

貝克曼庫爾特公司一直是流式細胞檢測技術的*,作為此次CYTO2017的展商,貝克曼庫爾特公司展示了6激光21色的CytoFLEX LX新型流式細胞分析儀與其他CytoFLEX系列家族的產品,為未來多色流式分析與微顆粒檢測等應用提供更完善的解決方案。
 


CYTO大會的會議內容涉及到流式細胞學應用的方方面面,涵蓋從新技術的開發、科研進展及臨床檢測等領域。在豐富多彩的會議議題中,單細胞分選及基因組研究、外泌體和細胞外囊泡是今年的熱點。眾多研究者都介紹了他們各自在這些領域的研究。


越來越多的研究者關注單細胞分選及其基因組研究是因為研究認為多細胞生物在細胞水平上內在就具有異質性,因此,為了真正了解生物系統的功能,需要進行單細胞水平的分析。過去由于技術上的不足,完成單細胞水平的分析幾乎是不切實際的,但zui近幾年有效的單細胞分析方法已經突破了技術瓶頸,可以將分析的分辨率從整個組織轉到個體細胞的水平,這些方法可以幫助研究者深入了解個體細胞的功能性質,進一步了解免疫、神經系統疾病以及癌癥的機理。微液流分選及流式細胞分選是目前研究者們采取的單細胞分選的主要方式。通過微液流分選系統可以用油滴將細胞與RNA雜合微球包裹住之后,完成細胞裂解以及反轉錄后即可進行基因測序和分析的工作。
 


與低速并且只能進行單一群細胞群分選的微液流分選相比,流式細胞分選可以在進行細胞分析的同時將單細胞分選至微孔板中進行后續基因測序的相關研究,并且MoFlo Astrios EQ等具有Index Sorting的流式細胞分選儀可以回溯單細胞所處于細胞群的具體位置,可以更有效的將蛋白表達及基因組學的信息進行整合分析。

外泌體或細胞外微囊泡(EV)等微顆粒作為近年來的研究熱點,自然也在CYTO大會上被頻繁提到。許多學者認為外泌體或微囊泡是細胞與細胞間進行長距離通訊的*物質。它們可用作不同化合物的載體,包括蛋白質、脂質和核酸。病原體在微顆粒釋放方面表現突出,可以在變化過程中調節細胞通訊,特別是在操縱宿主反應方面。外泌體或微囊泡的大小范圍在100nm至1mm之間,很難進行檢測和鑒定。傳統的方法是通過差速超速離心和大小排阻色譜分離EV,再進行后續的高分辨顯微鏡,蛋白提取或RNAseq等檢測。但也有研究者用高分辨率空氣激發流式分選儀(MoFlo Astrios EQ)進行EV分選,MoFlo Astrios EQ的增強型雙前向角設計可以有效區分出噪音與100nm微小顆粒間的差異。分選后還可以用新一代的雪崩光電二極管(APD)流式比如CytoFLEX,NanoFCM進行蛋白表達的分類分析。

貝克曼庫爾特在CYTO2017上新展出的6激光21色 CytoFLEX LX新型流式細胞分析儀采用APD作為檢測器,APD的光電轉化效率比傳統的PMT檢測器更高,擁有更強的信號級聯放大效應,因此比傳統檢測器更靈敏,可檢測更小、更微弱的信號。與傳統儀器使用488nm激光作為FS/SS信號的激發源相比,CytoFLEX LX可以選擇波長更短的405nm激光作為激發源,獲得的VSSc通道的信噪比更好,特別適用于進行小顆粒檢測。

 

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